Mise Au Point Et Validation D’une Nouvelle Méthode De Dosage De La Vancomycine Dans Le Plasma Par Hplc

Résumé: La Vancomycine est un antibiotique glycopeptidique, son usage est réservé aux hôpitaux pour la prise en charge des infections dus à des germes multirésistants pour lesquels il représente le dernier rempart thérapeutique. Son efficacité pourrait toutefois s'accompagner d'une toxicité rénale et auditive. C’est pourquoi, chez les patients à risque, son suivi thérapeutique pharmacologique est fortement recommandé. Afin de garantir une prise en charge optimale du patient, la fiabilité des résultats obtenus est capitale, celle-ci est conditionnée par une validation préalable de la méthode bio-analytique qui sera utilisée, et cela, en se basant sur des tests statistiques bien définis. L’objectif de ce présent travail est de mettre au point, d’optimiser et de valider une nouvelle méthode de dosage de la Vancomycine dans le plasma humain par Chromatographie Liquide à Haute Performance, en utilisant la démarche harmonisée basée sur le profil d'exactitude comme outil décisionnel, publié par la Société Française des Sciences et Techniques Pharmaceutiques (SFSTP) dans la revue STP pharma pratique 2006. Une nouvelle technique de dosage plasmatique de la Vancomycine par CLHP, en utilisant l’étalonnage interne, a été développée aux laboratoires de Chimie Analytique et de Biochimie du département de pharmacie de Tizi Ouzou pour une future utilisation en routine. Les conditions opératoires optimisées de cette méthode, dont la température, le débit d’élution, la composition de la phase mobile, son pH et les modalités de précipitation ont été décrites. Après déprotéinisation par l’acide perchlorique, la séparation chromatographique est faite sur une colonne C18 à 30 °C, avec une phase mobile composée d’un tampon phosphate de sodium monobasique et du méthanol, élués selon un mode gradient. Le Céfotaxime est utilisé comme étalon interne (EI). La détection est assurée par spectrophotométrie UV-Visible à une longueur d’onde de 220 nm. Le temps d’analyse obtenu est de 14 minutes. Les limites de quantification basse et haute sont respectivement 13,22 et 50 mg/L, la régression entre les concentrations introduites et prédites est linéaire dans les limites de quantifications avec un coefficient de détermination linéaire de 96,47 %. Les biais relatifs sont largement inférieurs à ± 10 %, la répétabilité et la reproductibilité sont inférieures à ±5 % et l’erreur totale ne dépasse pas les limites d’acceptabilité prédéfinies [-15%, +15%] dans l’intervalle de dosage accepté. La méthode de dosage élaborée s'est avérée simple, sensible, facile à mettre en oeuvre, rapide, spécifique, fidèle, juste, exacte et linéaire dans l'intervalle [13,22-50] mg/L, avec un risque d'avoir un maximum de 15 % des futures mesures en dehors des limites d'acceptation fixées. En conclusion, la méthode conçue est validée et apte à être utilisée en routine pour le dosage de la Vancomycine dans plasma chez les patients traités par cet antibiotique et nécessitant un suivi thérapeutique pour un éventuel ajustement posologique.

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