Recherche De Gènes D’intérêt Impliqués Dans La Caractérisation Des Exopolysaccharides Produits Par Des Microorganismes

Résumé: Les exopolysaccharides (EPS) produits par les bactéries lactiques (LAB) ont gagné une attention importante au cours des dernières années en raison de leur contribution à la rhéologie et à la texture des produits alimentaires. A ce titre, cinq souches LAB ont été isolées à partir de différents échantillon animalier et végétal. L’utilisation d’un milieu à base de rouge de ruthénium a révélé la production des exopolysaccharides par ces souches, qui ont été en premier lieu identifiées au genre Leuconostoc sp. sur la base des caractéristiques phénotypiques et de l'identification moléculaire à base de PCR en utilisant des amorces spécifiques au genre en amplifiant un fragment d'ADN de 1200 pb. Le séquençage de l’ADNr 16S de ces souches a permis de donner une taxonomie plus précise de ces isolats au niveau de l’espèce. Au total, 3 souches ont été identifiées respectivement à Leuconostoc mesenteroides, 1 à Leuconostoc mesenteroides subsp mesenteroides et 1 à Leuconostoc citreum. L’analyse des séquences du gène d'ADNr 16S a permis de construire un arbre phylogénétique. Par ailleurs, au niveau de la production et préparation des EPS, un milieu sélectif à base de saccharose a été utilisé et montre une importante viscosité. D'autres travaux, y compris la précipitation, l'hydrolyse des EPS et le dosage des sucres totaux par la méthode phénol acide sulfurique ont été déterminés. Les résultats ont montré que la production de EPS varie entre 654 mg / l et 1254 mg / l pour la production la plus élevée par la souche Leuconostoc mesenteroides LGM-L14 et que la viscosité apparente s’étend de 191 à 1393 centpoises (cP). D’autre part, la caractérisation en chromatographie sur couche mince des EPS hydrolysés indique la présence uniquement du glucose qui a permis d’identifier ces polymères au dextrane. Les investigations menées sur la caractérisation structurale des EPS par l’analyse de FTIR, RMN (H1et C13) ont confirmé qu’il s’agit d’un α (1,6) dextrane avec un faible pourcentage de ramifications α (1,3). Le gène de la glucosyltransférase (GTF) a été amplifié positivement chez 6 isolats de Leuconosoc par PCR en utilisant des amorces dégénérées; ce gène fonctionnel a été utilisé comme marqueur pour évaluer le potentiel de ces bactéries pour la production de dextrane. Les isolats de Leuconostoc sp. se sont montrés des producteurs potentiels de dextrane, qui trouve des applications dans divers secteurs utilisateurs, ils peuvent être utilisés comme agents épaississants ou gélifiants dans les industries alimentaires.

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