Isolement Et Purification L'aspartyl- Protéase Produite Par Fermentation Fongique

Résumé: Ce travail montre l'isolement et la purifcation de l'aspartyl-protèase fongique. L'aspartyl-protèase secrétée dans les milieux de cultures peuvent être exo-cellulaire ou endo-cellulaire. La purification des protèase passe en trois grandes étapes : extraction, séparation (isolement) et une purification. A la fin de l'étape d'extraction on montre que : A partir d'une culture fongique ou culture microbienne, suivi d'une filtration et centrifugation on obtenus trois résultats qui sont : broyat mycélien ou d'une broyat membranaire, nous avons extrait des enzymes exo-cellulaire, mais a partir d'un filtrat nous avant extrait des enzymes exo-cellulaire. On remarque que toutes les opération d'isolement et de purification de l'aspartyl-protèase sont effectuée a froid (de 0° C jusqu'a 4° C). Il sont passé en trois grande étapes : L'isolement nécessite l'application de l'une des technique suivant : Sonication, congélation-décongélation, broyage ou agitation avec des abrasifs, désintégration à haut pression , lyse ( chimique ou enzymatique) Fractionnement par précipitation : la précipitation nécessite l'ajout d'une solution alcoolique de tanin à 3 pour cent jusqu'à 3 pour mille, ou bien par ammonium de sulfate qui est utilisée a trois pourcentages (30, 65, 80). Purification par combinaison au moins de deux techniques chromatographique.

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