Extraction Et Mécanisme De Production Des Protéases D'asprergillus Niger Cultivé Sur Milieu À Base De Lactosérum Indistruel

Résumé: Ce travail montre l'utilisation de lactosérum industriel comme milieu de culture d'aspergillus niger pour produire des enzymes protéolytiques par la fermentation semi-solide. Ces protéases d'Aspergillus niger secrétées dans les milieux de cultures peuvent êtres exo-cellulaires ou endo-cellulaires. En fermentation semi-solide, les quantités d'enzymes produites sont supérieures à celles issues de fermentation submergées. La purification des protéases passe en trois grandes étapes : extraction, séparation ensuite une purification. A la fin de l'étape de l'extraction on montre que : ? partir d'une culture fongique ou culture microbienne, suivi d'une filtration et centrifugation on obtenus trois résultats qui sont : un broyat mycélien, un broyat membranaire et un filtrat et à partir d'un broyat mycélien ou d'un broyat membranaire, nous avons extrait des enzymes endo-cellulaires, mais à partir d'un filtrat nous avant extrait des enzymes exo-cellulaires. On remarque que toutes les opérations de séparation des protéines sont effectuées à froid (de 0? C jusqu'à 4? C). ils sont passé en deux étapes : La précipitation nécessite l'ajout d'une solution alcoolique de tanin à 3% jusqu'à 3 ‰, ou bien par Ammonium de sulfate qui est utilisée à trois pourcentages (30%, 65% et 80%). A la fin de cette étape, on détermine l'activité protéasique et les protéines totales. La 2ème étape est la dialyse par le tampon acétate phosphate à pH 4,0, sous agitation pendant 24 h en chambre froide par utilisation de membrane de dialyse de cellophane. En fin l'objectif de l'extraction des enzymes est d'isoler une molécule enzymatique d'un mélange pour étudier leurs caractéristiques (la solubilité, la taille, la structure, la charge électrique et les affinité de liaison spécifique).

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