La Β-caséine Cameline : Purification, Étude De La Sensibilité Aux Enzymes Digestives Et Activité Anti-oxydante
Résumé: Le lait camelin est resté longtemps inexploré. Cependant, un intérêt grandissant lui a été porté ces dernières décennies, où il a fait l’objet de multitudes de travaux mettant en évidence des activités biologiques intéressantes de ses protéines et des peptides issus de leurs hydrolyses. Dans ce présent travail, nous nous sommes intéressées à la caséine β (β-CN), protéine micellaire majeure de ce lait. La β-caséine cameline a été isolée et purifiée à partir des caséines totales du lait camelin collecté dans la région d’El Oued par chromatographie échangeuse d’anions sur DEAE-cellulose en batch. La pureté de cette fraction a été contrôlée par électrophorèse sur gel de polyacrylamide dans différentes conditions. Les électrophoregrammes en PAGE-Urée et PAGE-SDS ont montré que la fraction correspondant à la β-CN migre en une seule bande bien focalisée. La sensibilité de la β-CN a été testée en examinant l’action de trois protéases digestives (trypsine, pepsine et chymotrypsine). L'hydrolyse de la β-CN a été réalisée avec un rapport enzyme/substrat (protéine) de 1 :100 (m/m) pendant 240 mn à 37 °C. Les résultats ont montré que la β-CN est plus sensibles à l’action de la pepsine que la trypsine et la chymotrypsine. Ces résultats sont confirmés par les profils chromatographiques des hydrolysats obtenus après 240 mn d’incubation analysés par RP-HPLC. L’activité anti-oxydante de la β-CN ,de ses hydrolysats pepsiques et l’acide ascorbique (référence) a été évaluée en utilisant deux tests in vitro : test de DPPH (2, 2-diphenyl-l- picrylhydrazyl) et test l’ABTS (acide 2,2’-azino-bis-(3-éthylbenzothiazoline-6-sulfonique). Il ressort de ces tests que le potentiel antioxydant le plus élevé a été trouvé dans l’hydrolysat pepsique de la β-CN cameline. Les CI50 de la β-CN native, l’hydrolysat pepsique et de l’acide ascorbique sur DPPH sont respectivement de 1,78 µg/ml, 0,69 µg/ml et 4,74 µg/ml. Concernant le test ABTS les CI50 sont 0,66 μg/ml, 0,64 µg/ml et 2,11μg/ml respectivement.
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