Caractérisation Phénotypique Et Moléculaire Des Souches De Bactéries Lactiques Productrice De Bactériocine

Résumé: L’intégration de nouvelles souches lactiques provenant de différents écosystèmes est actuellement utilisée pour l’augmentation de la durée de bioconservation des aliments. Outre, l’activité probiotique de certaines bactéries lactiques est exploitée dans la production des aliments à caractères préventif et thérapeutiques. L’objectif de ce présent travail est l’isolement et caractérisation de bactéries lactiques productrices de bactériocine du lait maternel, l’optimisation de certain facteurs tels que le pH, la température d’incubation impliquées dans la production de la bactériocine. L’isolement des bactéries lactiques productrices de bactériocine est effectué à partir d’échantillons prélevés du lait maternel. Le criblage primaire des souches lactiques à partir de lait maternel, sur un milieu de culture gélosé a permis l’isolement de 28 souche lactique. Le criblage secondaire des bactéries isolées du lait maternel a permis la sélection de 13 souches lactique antagoniste ont été identifiées sur les plans physiologique et biochimique. L’étude des interactions a révélé un pouvoir inhibiteur de quatre souches sélectionnées fortement inhibitrices vis-à-vis de Staphylococcus aureus UT 602, S.aureus CECT 86T, S.aureus ATCC 25923, S.aureus ATCC 43300 et E. coli ATCC 25922. L’effet antagonique a été évalué par des techniques de diffusion sur gélose (méthode de double gélose, méthodes des puits). L’amplification du fragment d’ADN codant la régions 16S ARN des quatre souches lactiques, sélectionnés hautement antagoniste et leur séquencage ont révélé leur appartenance aux espèces suivants : LbL15 :Enterococcus faecium, LbC11 : Enterococcus faecium, LbC3 : Lactobacillus brevis, LbL4 : Lactobacillus sakei. En soustrayant l’effet du pH, du H2O2 l’inhibition reviendrait à des facteurs antimicrobiens de nature protéique (bactériocine) comme il a été révélé avec Lactobacillus brevis (LbC3). L’optimisation de la production de la bactériocine sur milieu MRS est rendue meilleure à un pH de 6 et à une température de 30°C. La cinétique de croissance d’E.coli ATCC25922 en présence et en absence de la bactériocine produite par L.brevis (LbC3) a montré que la biomasse bactérienne a diminué progressivement après l’ajout des bactériocines. Les résultats des tests technologiques de cette souche sont satisfaisants pour une utilisation industrielle car elle possède une activité protéolytique et un bon pouvoir acidifiant. L’antibiotype de la souche LbC3 montre 50% de sensibilité vis-à-vis des antibiotiques tests. L’étude des interactions inhibitrices de la souche LbC3 à l’égard de bactéries pathogènes envisagera leur utilisation à des fins technologiques.

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