Etude De L’allergénicité Des Protéines Du Lactosérum Bovin Après Hydrolyse Trypsique Et Chymotrypsique Combinée À Un Traitement Aux Micro-ondes

Résumé: Chez les enfants allergiques aux protéines du lait de vache, les hydrolysats poussés de protéines du lait de vache représentent le meilleur substitut du lait, mais ces produits ne sont pas totalement dépourvus d'allergénicité comme en fait état la littérature. L'objectif de ce travail est d'évaluer l'effet d'un traitement enzymatique trypsique et chymotrypsique combiné aux micro-ondes sur l'allergénicité des protéines du lactosérum.Les lactosérums ont subit une hydrolyse trypsique ou chymotrpsique combinée à un traitement par les micro-ondes (40°C) pendant 5 et 15 mn. Un autre lot de lactosérum a été soumis à une hydrolyse enzymatique de même type mais incubé au bain marie à 40 °C pendant 5 et 15 mn.46 souris femelles Balb/c sont divisées en 3 lots. Le 1er et le 2ème lot sont sensibilisés par voie intrapéritonéale en présence d'hydroxyde d'aluminium, respectivement à la Beta-Lg (n=20), et à l'Alpha-La (n=20). Le troisième lot (n=6) constitue le groupe témoin. Dans un premier temps, un dosage des Ig sériques (IgE, IgG, IgG1 et IgG2a totales) par la méthode ELISA a été effectué pour évaluer le degré de sensibilisation des souris. Dans un deuxième temps et afin d'évaluer l'allergénicité des hydrolysats, une étude invitro des interactions des protéines allergisantes et des hydrolysats avec la muqueuse intestinale des souris immunisées a été effectuée par la chambre de Ussing. Dans la dernière partie de notre travail, nous avons réalisé une électrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de SDS du lactosérum natif et des hydrolysats afin de s'assurer de la présence ou non des principales protéines du lactosérum avant et après traitement. Nos résultats montrent : Des titres élevés en immunoglobulines sériques IgG, IgG1, IgG2a et IgE anti Beta Lg et anti Alpha-La, indiquant un degré de sensibilisation élevé des souris immunisées.En chambre de Ussing, les antigènes sensibilisants stimulent significativement l'Isc et la conductance, traduisant une augmentation de la sécrétion électrogénique de chlorures.Les hydrolysats trypsiques à 5 mn, chymotrypsiques à 15 mn traités aux micro-ondes et les hydrolysats chymotrypsiques à 15 mn traités au bain marie montrent une allergéninicité significativement diminuée respectivement de la Beta-Lg et de l'Alpha -La; les autres traitements s'avèrent inefficaces. Le profil électrophorétique révèle l'apparition avec une faible intensité voire même absence des bandes protéiques du lactosérum des hydrolysats traités aux micro-ondes.En conclusion l'hydrolyse enzymatique combinée aux rayonnements micro-ondes semble diminuer l'allergénicité de la Beta-Lg suggérant une meilleure hydrolyse par les protéases, ntrairement à l'Alpha-La dont l'allergénicité s'est vue stable sous l'influence des micro-ondes, ce qui est probablement du à sa résistance à l'hydrolyse ou à un démasquage des épitopes allergéniques initialement enfouis dans sa structure tertiaire.

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